申明莉 李淑华 王世芳 王文佳 刘莹 麻昊良 刘世佳 贾秀丽
黑龙江省牡丹江市康安医院检验科 黑龙江牡丹江157011
[摘要]目的 检测肾综合征出血热患者外周血EBV-DNA和血清EBV-DNA的载量，研究EBV病毒与疾病的严重程度及病程的关系。方法：收集2019年2月至2020年12月在我院确诊为肾病综合征出血热的患者：血清免疫学检测EBV-VCA-IgM、EBV-VCA-IgG、EBV-EA-IgG、EBV-NA-IgG进行鉴别诊断EB病毒既往感染还是近期感染。2种实验方法结合用以评估EB病毒在肾病综合征出血热疾病中的致病作用。结果：免疫血清学检测显示大约94%的出血热患者是既往感染，6%的肾病综合征出血热患者是EB病毒复发活动。结论：针对肾病综合征出血热疾病低血压少尿期中血清EBV-DNA检测可获得更趋近的临床效果.血清学检测肾病综合征出血热患者的EBV-DNA含量更能快速反应患者感染EB病毒的情况。
[关键词]肾病综合征出血热低血压少尿期 、EBV-DNA定量、致病作用、鉴别诊断、病情评估、预后判断
EB病毒为疱疹病毒科，疱疹病毒IV型，是一种嗜人类淋巴细胞的疱疹病毒。[1]主要经唾液传播，人群中感染率超过95%，EBV感染后可在口咽部上皮细胞内增殖，引起呼吸道感染，并可长期潜伏在淋巴组织中，因此，其感染具有增殖性和潜伏性的特点。[2]现选取在我院确诊为肾病综合征出血热的患者作为此次的研究对象，探究EB病毒在肾病综合征出血热低血压少尿期疾病过程中的价值评估，现将此次研究作如下内容报道：
1资料与方法
1.1一般资料：自2019年2月至2020年12月期间，选取在我院确诊为肾病综合征出血热的100例患者作为此次的研究对象，其中男性89例，女性11例，最小年龄为39岁，最大年龄65岁平均年龄（52.5±3.8）岁。
1.2方法
1.2.1研究方式：常规采集静脉EDTA抗凝血全血2ml检测EBV-DNA、静脉全血5ml分离血清备用，用于血清EBV-DNA定量和免疫血清学检测；选择酶联免疫法和荧光定量PCR法。酶联免疫法检测：鉴别诊断采用（北京贝尔生物工程股份有限公司）试剂；EBV-DNA定量采用湖南圣湘生物科技股份有限公司试剂，对所有实验对象进行检测以验证实验的预期价值评估。
1.2.2检测方法：实验检测活动必须在检测试剂产品试用期内进行，并且严格按照标准SOP操作，酶联免疫实验结果判定：
EBV-VCA-IgM、EBV-VCA-IgG、EBV-EA-IgG、EBV-NA-IgG
样本A值临界值（Cut off）者为抗体阳性
样本A值<临界值（Cut off）者为抗体阴性；
EBV-DNA定量结果的判定：
对于测定值在4.00E+02-4.00E+09copies/ml之间的样本，报告相应的测定结果
对于测定值>4.00E+09copies/ml的标本，报告注明>4.00E+09copies/ml
对于测定值<4.00E+02copies/ml的标本，同时，内标检测为阳性（Ct值40），报告注明EB病毒DNA低于试剂盒检测下限。
1.3统计学处理：选择SPSS10.0统计学软件，组间计量资料比较采用t检验，组间计数资料采用（均值±s）进行X2检验，P<0.05表示比较差异具有统计学意义。
2结果
见下表
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3讨论
EB病毒长期潜伏在人体淋巴组织中，当机体免疫功能低下时，潜伏的EB病毒活化形成复发感染。EBV-DNA检测为临床EB病毒感染提供最直接的感染证据。肾综合征出血热主要是由鼠类携带传播的汉坦病毒引起的一类自然疫源性疾病。淋巴细胞从肾综合征出血热发病开始逐渐升高，镜检异型淋巴逐渐升高，行至发热末期到少尿期，镜检主要是异型淋巴细胞。随着分子生物学检测技术的发展，临床现已引入了荧光定量PCR检测EBV-DNA,通过定量检测患者血清EBV-DNA的水平反映体内病毒感染和复制情况，此期检测血清EBV-DNA，评估EB病毒感染在肾综合征出血热疾病中的临床价值。
在此次研究活动中，三组实验对象的全血EBV-DNA阳性率分别是98%、96%、52%；血清EBV-DNA阳性率为12%、16%、0。1、2组数据中免疫学血清检测有相应的阳性比例，阳性比例较小，而健康对照组全血EBV-DNA有52%的阳性率，既往感染率为94%，但病毒载量均在4.00E+02-9.00E+02之间，属于低值，无显著临床意义；血清EBV-DNA病毒载量阳性率为0；肾综合征出血热患者全血EBV-DNA的病毒载量在4.00E+03-5.00E+06之间，病毒定量较中高，血清EBV-DNA的病毒载量为4.00E+02-4.00E+03比例分别为12%、16%,说明EB病毒核酸与EB血清学检测结果之间的一致性较差[3]监测血清EBV-DNA病毒载量更能真实反应EB病毒在机体内的活动状况，EB病毒活化形成复发感染，可以引起发热、淋巴结、肝脏和脾脏肿大，加重肾综合征出血热患者的临床症状，临床给予相应的对症抗EB病毒药物阿昔洛韦或更昔洛韦治疗，可减轻患者痛苦，缩短病程，增加治愈率。
参考文献：
[1]谢正德，刘春艳，艾军红，等. EB病毒感染实验室诊断及临床应用专家共识[J]. 中华实验和临床病毒学杂志，2018，32(1)：2-8.
[2]陈新敏，梁华，郭燕，等. 异型淋巴细胞比例联合EB病毒抗体及核酸检测在儿童传染性单核细胞增多症辅助诊断中的应用[J]. 国际检验医学杂志，2021，42（4）：501-503.
[3]朱耀武，王春玉、潘莹莹，等. EB病毒核酸及血清学检测在EB病毒相关疾病中的应用研究[J]. 中华检验医学杂志，2017，40，（3）：195-200. 课题编号：2019-428