李雷
广安区人民医院 四川 广安 638000
真菌是一种真核细胞型微生物，存在细胞核但是无叶绿素，吸取营养方式主要包括寄生和腐生。真菌在大自然中分布十分广阔，已知的大概有20万种左右，大部分不会对身体造成损伤，但是少部分会对致使动物和人类发病。其中致使人类患病的真菌大致有300种，根据对人体侵犯位置的差异性将致病菌分为两大部分，即深部真菌和浅部真菌，浅部真菌会对指甲、毛发、皮肤造成侵犯，深部真菌会对内脏、深部组织、黏膜造成侵犯，如果情况严重还会产生全身播散性感染。近几年随着体内留置导管、免疫抑制剂、放化疗、广谱抗生素的使用，致使真菌感染占比明显上升且严重。这就需要对真菌进行检验以明确类型，进而为疾病的治疗提供有效数据。
一、引发真菌感染疾病的因素
艾滋病、放化疗、导插管、静脉营养、器官移植、大手术、外伤、慢性消耗性疾病、尿毒症、血液疾病，长时间使用免疫抑制、皮质激素以及光谱抗生素，这些均属于真菌感染疾病诱发原因。
二、为什么要进行真菌检验
随着真菌感染菌 种构成的变化、新的条件致病真菌不断增加、真菌感染率的提高，真菌耐药性逐渐增加，临床必需重视真菌的检验工作，明确真菌的种类和耐药性，为疾病治疗提供参考数据，有助于加速患者恢复。
三、真菌培养和真菌直接检查的意义
1.真菌培养：将病原菌从采集的标本中取出，明确有无真菌感染，区分真菌种类，可弥补直接检查的缺陷，还可以通过显微镜观察真菌的结构、形态、特征等，有利于全方面了解真菌，并指导临床治疗，此外获得的菌种还能够进行其他研究。
2.真菌直接检查：检验结果呈现阳性，可确诊患者感染真菌，如果为阴性则不确定是否感染真菌；通过真菌镜可以明确部分病原菌菌种，比如花斑癣菌、新型隐球菌等，还能够明确菌属，比如念珠菌属等；可见真菌形态，提示此菌在组织中的形态，也就是组织象；能够显示真菌的活动性，比如念珠菌产生假菌丝和真菌丝，皮肤癣菌菌丝粗壮且分叉多。
四、真菌培养和真菌直接检查
1.真菌直接检验方法：在玻璃载片上放置标本，滴入载液后覆盖玻片，等待片刻后在火焰上快速通过三次，不可持续加热，预防结晶。之后对盖玻片轻压，将气泡清除的同时压薄标本，将周边溢液清理干净，放置显微镜下观察。注意载液禁止溢出至盖玻片上，此外标本必须压薄，检查过程中需避开强光操作，先选择低倍镜，判断是否存孢子和菌丝，之后再通过高倍镜检查，判断孢子和菌丝的排列、大小、位置、特征、形态等。
2. 真菌培养方法：选择脱水培养基并放入相应剂量的蒸馏水中，摇晃制成混悬液。对其缓慢加热，煮沸1分钟后取下，高温灭菌前分装试管，高温灭菌后分装平皿，待其温度降至45-50℃时，将其分装，贴上标签放置室内温度环境中24小时，之后置于4℃的冰箱内存储。标本接种后可通过显微镜或者涂片了解孢子和菌丝详情。
3.标本采集注意事项：标本采集方法需根据患者详情进行操作，比如疑似浅部真菌感染，比如体癣，可在病变位置刮取边缘痂，如果疑似深部真菌感染，需采集脓汁、痰液、脑脊液、血液等进行检查；确保在用药治疗前完成标本的采集，如果已用药需停药一星期后再采集标本；标本必须足量，通常情况下活体组织2份（镜检和培养1份、病理科检验1份）、皮屑两块、胸腔液为20毫升、脑脊液与血液为5毫升；采集标本使必须保证在无菌操作下完成；标本采集完成后要立即送检，标本存留时间不超过2小时，尤其是深部真菌标本。
临床真菌检验工作十分重要，看根据其结果有效判断疾病，进而合理用药可确保治疗的有效性和安全性。此外还需重视检验工作质量，检验人员需具备专业操作能力，能够正确认识检验结果的阴性和阳性，判断有无问题、是否重新进行检验，以确保检验结果的准确性。