杨兴
中鑫光（武汉）科技有限公司 430074
摘要：高效液相色谱是以高压液体为流动相，采用经典液相色谱法的色谱过程。高效液相色谱作为一种高灵敏度、高选择性的快速分离色谱，在医疗保健、食品安全、环境化学等领域得到了广泛的应用。仪器在使用过程中不可避免地会遇到一系列问题，影响仪器的正常工作。保证仪器的正常运行，保证分析人员能够准确可靠地分析数据。仪器操作人员如果能够按时进行日常维护工作，了解常见故障的预防和排除方法，就能最大限度地发挥仪器的性能。根据实践经验和有关资料，本文简要介绍了高效液相色谱仪的科学维护和故障排除。
关键词：高效液相色谱；故障诊断；排除；方法
1、高效液相色谱概述
高效液相色谱是19世纪60年代末发展起来的一种分析方法。近年来被广泛应用于活性成分、营养强化剂和保健食品中。高效液相色谱法可用于分析世界上大约80%的有机物。高效液相色谱由输液系统(含储液罐、高压泵等)、分离系统(含采样器、高压泵等)、色谱柱、检测系统(含试验等)、采集系统(含馏分采集器、，自动采集装置）等，这些系统就象人的脉络一样相互依赖，每个环节的故障都会影响检测结果的可靠性和真实性。因此，液相色谱仪的故障排除和日常维护对延长色谱仪的使用寿命至关重要。
2、高效液相色谱仪常见故障及处理方法
2.1输液泵常见故障及处理
2.1.1止回阀的故障及处理
球阀和阀座的密封不严密，即使球阀和阀座粘在一起，也会导致液体回流和压力不稳定。处理方式，应当立即打开排气阀，用高流速溶液冲洗泵，直到排放呈线性。如果泵进口处有气泡，也可以排出泵头上的气泡，具体方法是:用扳手握住进气泡的泵头，松开出口管的压力盖，用手泵送液体，然后将看到气泡从孔中挤出，直到气泡流出并拧紧压力盖。如果压力仍然不稳定，可以认为止回阀磨损，球体不光滑，需要更换零件。
2.1.2泵垫圈故障
泵密封的常见问题是系统密封泄漏和污染。严禁采用强酸和强碱溶液进行冲洗，溶液的pH值一般调整为中性。如果密封圈与活塞杆紧密接触，使活塞在泵头内自由移动，不发生泄漏。实验室可以每三个月更换一次清洗机，以避免污染泵送系统。
2.2检测器常见故障及处理
2.2.1检测器污染及对策
当用缓冲盐代替不同液相的流动相时，检测器的流速会降低，检测器管路中常出现沉淀现象。处理方式可以先用5倍非缓冲液冲洗逆流相系统，再用10倍柱体积的强溶剂(如乙腈)冲洗，再用50倍柱体积的异丙醇冲洗。最后用逆流相平衡代替。探测器管线堵塞，常导致柱压升高。此时，可以断开连接，直接与探测器相连。我们的经验是调整检测器的进出口，用硝酸溶液回流到检测器。这样可以快速冲洗堵头，但注意用小流量冲洗，并观察压力变化。
2.2.2池阻塞和污染及对策
总的来说，池堵塞事故很少发生，但池污染却经常发生。降低仪器的基本噪声和灵敏度通常会增加池的污染。这时，有必要进行清扫。清洗步骤可采用回抽10ml异丙醇去掉流动相残留，回抽10ml蒸馏水，回抽10mL6mol/L硝酸，通过池去掉沉积物。为了减少风险和麻烦，更彻底地清洗，也可采取打开水柱，在检测器出口处连接一根长约50cm的小聚乙烯软管。将试剂瓶向上推至容器另一端上方的检测器入口，采用化学或物理抛光方法对电极表面进行清洁，以提高检测灵敏度。但要注意用纯水冲洗，不要有其他污染。
2.3仪器指示灯提示故障及处理
2.3.1接头处漏液
检查各仪表泄漏部位，用滤纸擦拭。如果是液体，擦拭干净后用吹风机或自然空气风干。继续观察是否存在泄漏，当泄漏时，用扳手拧紧螺钉，看是否仍有泄漏。
2.3.2色谱柱漏液
在实际操作中，色谱柱经常更换，色谱柱尾部的密封容易松动和泄漏。如果仍需更换夹紧螺钉以排空液体，请轻轻拧紧螺钉。
2.4压力过高及故障处理
高效液相色谱仪在使用过程中经常受到压力波动的影响，由于系统不能提供稳定准确的流速，因此可以从以下几个方面进行研究。
2.4.1检查流速
当破气阀打开时，流量设定值相对较高。如果破气阀关闭，流量不降低，可能会发生瞬态压力波动，泵将停止。此时将流量调低，泵重新启动即可。
2.4.2破气阀滤芯堵塞
拆下破气阀和金属密封件，将看到白色滤芯。滤芯上的黑色污垢表明滤芯需要更换。更换后，问题就可以解决了。
3、高效液相色谱仪的日常维护
3.1清洗溶剂过滤头
溶剂滤头可以先过滤流动相，但由于浸泡或使用时间长，容易堵塞和污染，导致一系列泵故障。定期清洗溶剂过滤头是保持高效液相色谱的重要步骤。
操作方法:将溶剂滤头浸入5%硝酸溶液中，超声波清洗，用优质高效液相色谱水清洗数次(塑料滤头为非超声波)。或将溶剂滤头浸泡在5%硝酸溶液中过夜，轻轻摇动3~5次，用优质高效液相色谱水冲洗，清洗后安装在系统上。打开排气阀吹扫清洗。
3.2清洗单向阀
如果在实验中使用的液相中加入缓冲盐和其他物质，很容易沉淀出更高的有机盐颗粒，从而在球座上形成细小的固体颗粒。使用含缓冲盐的流动相后，球与球座之间密封不良，止回阀堵塞污染，应及时冲洗泵或止回阀，以保证止回阀的正常运行。
操作方法:分别标记入口止回阀和出口止回阀，然后预先加入纯水，放入玻璃烧杯中，用纯水超声清洗10分钟以上。纯水加热到50度左右，清洗效果更好。
3.3清洗检测池
流动相样品中含有缓冲盐或杂质，容易污染和堵塞测试槽，导致底物不稳定、漂移或峰形过小，出现峰分叉。定期清洗测试，延长高效液相色谱仪的使用寿命。
操作方法:用注射器吸取10ml异丙醇清洗除去流动相残渣，然后提取10ml纯水冲洗。从6mol/L以上的硝酸提取10毫升，小心地除去沉淀物。最后，用至少1毫升纯水冲洗。
4、结束语
本文介绍了高效液相色谱仪常见的问题及解决方法。液相色谱仪的维护在日常工作中非常重要。良好的记录习惯是成功排除故障的关键。只有分析原因，才能正确处理。通过解决这一问题，液相色谱仪可以在分析过程中保持最佳工作状态，大大延长仪器的正常使用寿命，最大限度地提高仪器的性能。保证检测结果的准确性，降低测试成本。希望本文通过分析能给大家提供一些经验和帮助。
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