微生物检验的基本操作之无菌操作--中国期刊网

字体：大中小

首页> 原创作品> 正文

微生物检验的基本操作之无菌操作

发表时间：2021/8/26 来源：《医师在线》2021年4月7期作者：罗蓓蓓

[导读] 微生物检验的基本操作之无菌操作

罗蓓蓓
（都江堰市人民医院；四川成都611830）
　　　无菌指的是环境中一切有生命活动迹象的微生物的营养细胞和芽孢、孢子都不存在的状态，而无菌操作指的是在无菌环境下进行的植物细胞培养、细胞传代培养和细胞接种等相关操作，其目的是避免微生物进入人体组织或是其他无菌范围内。若未按无菌要求执行操作，那么微生物检验所得数据将无法反映被检者的身体真实状况，检验工作自然也就变得毫无意义，而出于保护检验人员人身安全的角度考虑，无菌操作同样具有至关重要的意义，由此可以看出，无菌操作是微生物检验中的重要概念，也是基本操作，只有保证培养基和检测设备都处于无菌的状态下，才能够保证样品不受到污染，实现微生物检验的真实性、可靠性和准确性。无菌操作具体应该怎么做？本文将针对这一问题进行详细介绍。
一、明确无菌操作原则
1.在执行无菌操作过程中，必须明确区分物品的无菌区和非无菌区，在接种过程中要求操作者严格穿着工作服、佩戴工作帽，在进入无菌室之前需要使用肥皂认真清洗双手，并使用75%酒精棉球擦洗双手。
2.在执行相关操作之前二十至三十分钟，需要操作者启动紫外线灯和超净台，消毒灭菌接种所用吸管、培养基和平皿等用具，且要注意，已经打开包装但并未使用完的器皿，放置后不可再次使用，金属用具需要经过95%酒精点燃烧灼三次或经过高压灭菌后使用。在此期间操作者应谨记，不可直接用手触摸瓶塞等无菌物品，正确做法是使用消毒后的镊子、钳子等夹拿相关物品。
3.从包装袋中取出吸管时，应保证吸管尖部不触及外露部位，使用吸管接种试管或是平皿时，也应注意吸管尖部不可触及试管边缘或平皿边缘。
4.接种细菌和样品时，取出的吸管和打开的试管塞均需要通过火焰消毒，且接种样品和转种细菌时必须要在酒精灯前进行操作。
5.接种环以及接种针在接种细菌之前需要经过火焰烧灼全部的金属丝，必要时还应烧灼到环或针与杆的连接部位。
6.使用吸管吸取菌液或是样品时，应使用相应的橡皮头吸取，不可直接用口吸取。另外要注意，倾倒平台需在超净台内进行操作，而且要在开启或加盖瓶塞时使用酒精灯反复烧灼。

二、明确无菌操作内容
　　　无菌操作主要包括两方面内容，一是创造无菌的培养环境，包括密闭培养容器、培养基的灭菌和培养容器的灭菌等等。二是在操作和培养过程中需要避免其他微生物的侵入，包括紫外线杀菌、超净台消毒与检测等等。

期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆

1.无菌室的使用和维护
　　　无菌室的结构包括更衣间、缓冲间和操作间，需要操作者保证无菌室的密闭性，每日应用无菌室之前需要使用紫外线照射半小时至一小时左右，以保证无菌室的无污染状态，每日工作后需使用2%--3%煤酚皂溶液消毒擦拭，保证工作台面没有与实验无关的物品。无论是使用无菌室之前还是之后都应紧闭门窗，并打开紫外线灯，照射时间不得少于三十分钟，值得注意的是，在紫外线灯照射期间操作者应避免在紫外线下操作，以免引起损伤。另外，紫外线灯管需要每隔两周使用酒精棉球擦试一次灰尘和油垢，以免影响紫外线穿透力。操作者在处理或接种标本时需在无菌室内完成操作，但不可随意进出，如有传递物品需求，可通过小窗口传递，尽量减少样品的暴露时间，如果操作者因故离开无菌室，再次进入无菌室之前应重新洗手，并在缓冲间内更换手套、无菌鞋，穿戴无菌服、帽子、口罩等无菌用具。
　　　操作结束以后，操作者需要及时清理工作过程中产生的废液和废弃物，并清理工作台，将自身穿着的无菌服等用具放回缓冲间使用紫外灯消毒灭菌；无菌室环境需要定期消毒灭菌，应每日使用消毒水或75%酒精进行擦拭，每个季度还应使用乳酸、甲醛等熏蒸两小时的时间，必要时可增加熏蒸频次。
　　　
　　　超净工作台在使用之前同样需要使用紫外灯照射三十分钟以上的时间，并预留十分钟至十五分钟的工作时间，使用完毕后及时使用70%酒精擦拭台面和四周。无菌室内仅可以放置无菌操作台和转椅等物品，包括培养基、玻璃器皿、工作台、试管架等，不可放置与实验无关的用具。
2.无菌操作技术要求
　　　培养基经过高压灭菌以后需要使用灭菌的接种针和吸管等工具在无菌条件下接种样品、菌悬液等含菌材料在培养基上，这一过程为无菌接种操作，操作者需要保证在无菌室内的各种接种都完全按照无菌操作规范执行，具体要求包括：操作过程中不可以存在大幅度或是快速的动作；使用玻璃器皿时需要做到轻拿轻放；应在火焰正上方进行操作；使用接种用具前后必须要进行烧灼灭菌处理；接种培养物时应保证动作轻又准；不可直接用口吸吹吸管；带有菌液的玻片、吸管等器材需要及时放置在消毒桶内消毒灭菌。
　　　另外需要注意，任何一种检验样品和无菌物在打开之后都需要操作者与其保持一定的距离，不可直接用手接触样品或无菌物品，手臂也不可从样品或无菌物品的上方横过，即便无菌容器中取出的物品未受到污染，也不可放回原处。
　　　以上就是本文对微生物检验的基本操作之无菌操作相关方法和注意事项作出的介绍，希望检验工作者能够保持无菌意识，在工作过程中认真严谨的执行相关无菌操作规范，真正做到无菌处理、无菌检验，为临床提供更为可靠、准确的诊断依据。