孔民 李成（通讯作者）王圣涵 路玮 丁延辉
烟台市芝罘区疾病预防控制中心 山东烟台 264000
【摘要】病原生物检验作为当前疾控中心卫生检验一个重要项目，能够准确分析诊断治疗感染性疾病，为流行病学调查与研究提供相应的科学依据，但是病原微生物检验过程中十分容易受到一些因素影响，从而导致检验结果出现误差，因此，相关卫生检验部门必须要高度重视，合理应用微生物检验技术，及时分析微生物检验结果影响因素，并及时探讨质量控制策略，以提高微生物检验高效与准确性。
【关键词】微生物；检验技术；影响因素；质量控制；措施策略
因为病原微生物种类较为多样，并且体积相对较小，检验程度比较繁琐，再加上微生物检验过程中，因为检验人员技术水平高低不等、操作不规范等众多因素影响，会给检验结果质量造成严重影响，此必须要及时分析发现影响因素，以采取有效质量控制措施，提高检验结果真实性，对此需要从微生物检验标本采集、运送、分离、鉴定等环节中进行严格质量控制，以提高检验质量。
1、微生物检验技术影响因素
1.1标本因素
送检标本质量因素是影响微生物检验的一个常见因素，检验机构在进行送检标本检查时，常常存在标本质量较差或者标本数量过多等情况，这些都可能会给检验结果产生数据失误问题，例如标本数量过多或者过少，这些也会直接影响检验记过精确性，所以为了能够有效提高微生物检验结果，在标本送检时必须要高度关注标本质量与数量。
1.2操作流程因素
送检标本操作流程对于微生物检验结果也有着显著影响作用，如果操作流程间存在不当则会给检验结果准确性与有效性造成严重影响。当前大多数卫生检验机构在开展微生物检验时，并没有严格明确操作流程，促使结果数据分析与整理时出现一系列问题，比如送检检验标本开展步骤失误，导致标本提前或者延迟和配套试剂发生反应，这会直接给微生物检验结果造成影响[2]。因此，针对微生物检验时，必须要高度关注标本操作流程。
1.3检验环境因素
检验室环境因素会给微生物检验造成一定影响，针对微生物检验室设计以及布局上，必须充分考虑各个检验设备安装、操作规范等情况，最大限度防止环境给检验样本造成污染，或者是引发菌种间交叉污染，预防有害生物因子污染环境。因为微生物十分容易吸附在悬浮粒子中，所以空调净化系统因素也是影响微生物控制的一个影响因素，需要高度关注[3]。
1.4检验人员因素
检验人员作为微生物检验工作开展的重要人员，检验人员专业水平能够在一定程度上影响检验结果准确性，但是当前微生物检验工作开展时，仍然存在许多问题，例如检验人员未能详细掌握微生物检验流程与试剂量，或者无法充分应用相关技术，从而导致检验流程无法准确操作掌握，这些都是影响检验结果的常见问题[4]。因此，必须要重视检验人员因素，加强检验人员技术水平，为微生物检验结果提供重要保障。
3、提高质量控制方法
3.1仪器检验检测方法
微生物检验质量控制提高需要从检验标准化与规范化方面入手，而这就要求有效应用现代技术手段与检测仪器设备。现阶段国内比较广泛应用的自动检测技术与系统是Biolog、Midd与Sensitire等，这些在应用效果角度上都拥有较高的准确性与有效性。比如Vitek-AMS，作为全球范围内微生物检验设备与系统的一个统一认可系统，该应用检验过程中，一般需要先进行鉴定菌悬液的准确制备，同时还需要在各个细菌小卡上进行菌悬液接种，放置在读数孵箱中保存，每间隔一段时间会自动给予培养基发酵情况开始检测，接着转换成相应生物编码；之后借助计算机给予有效判定，打印出鉴定结果。现阶段应用在这个食品检验系统的鉴定卡一般有14种，而每种具体鉴定卡片又包含25种生化反应指标，因此在进行检验时，需要对检测时间进行准确控制，通常时间不可以大于20h，避免对检验结果准确性造成影响[5]。
3.2加强室间质量控制
室间质量控制的主要内容包括：①采用染色镜检的方式来明确微生物的鉴定方向；②对病菌株的分离、培养、筛选以及鉴定；③使用鸟氨酸脱羧酶、染色、触媒、脲酶、氧化酶以及血浆凝固酶等完成相关的生化试验。检验质量控制中心将相关的检验样本分发给不同的实验室之后，然后再考核实验人员的实验操作能力，再根据检验的结果对实验室的室间质量控制进行评定。进而提高检验人员的技术水平以及理论知识水平。
另外，需要加强检验过程中质量保证，检验人员要具有良好的职业道德、熟 练的实验技能，熟悉实验室质量管理流程。微生物实验室所用的各种试剂都应在标签上标记名称、浓度、储存条件（购买试剂按照说明书执行）、配制日期、ｐＨ值、有效期、生物危害性，同时做性能检测。培养基是临床标本中微生物分离鉴定的重要材料，其质量的好坏直接关系到实验结果的准确性。无论培养基是自制的还是购买的，所有培养基都应进行相应的质量控制，包括无菌试验、细菌生长试验、细菌生长抑制试验（适用时）、生化反应（适用时）等。
3.3完善质量控制体系
为了能够有效做好微生物检验质量控制，需要针对微生物检验质量与数量控制体系进行合理科学完善，在开展微生物检验工作前期，相关检验机构必须要严格做好送检标本质量与数量管理工作，对此检验机构能够给予微生物检验实验室分区细化管理，例如分别分成微生物净化实验室、微生物无菌实验室、检验实验室等各个区域，并且针对各个区域开展相应的细化管理，从而能够有效提高标本送检质量；除此之外，在进行各个检验工作过程中，还需要高度重视标本送检数量控制，合理控制好标本量，从而确保微生物检验结果高质量与高准确性[8]。
3.4提高检验人员专业水平
对于微生物检验进行前，必须要严格确保各个检验人员明确操作流程，并且将各个标本检验各个阶段消耗时间与试剂类型、剂量与摆放位置规范化；对于检验人员必须要具备较强的专业水平，定期进行专业知识能力考核，只有考核通过后才可以进行检验工作，如此一来，能够有效保证检验人员具备较高的专业性技术水平，从而在检验过程中，可以详细做好数据记录，并且合理有效整体微生物检验结果，结合自身专业知识技能储备，有效提高微生物检验质量[9]。另外，只有检验流程规范化与检验人员专业水平提高，才可以及时发现检验中存在问题，以及时解决，避免严重误差出现。
3.5正确选择检验培养基
对于检验培养基选择上，各个检验人员必须要重视以下几点：①密切关注培养基具体使用期限，避免检验应用污染、过期或者失水培养基。②针对所有应用培养基，在配置称量上一定要具备准确详细记录，同时应用后将剩余培养基严格密封保存。③进行培养基配置时，必须要严格检查组成材料质量情况，如果发现材料发生变色或者凝结，则必须禁止使用[10]。④在选择购买培养基试剂上，一定要详细查看生产日期、保质期与产品质量，保证购买培养基试剂合格。⑤结合微生物检验工作合理规划，保证检验时培养基在有效期内。购买培养基时，优先选择国内外知名度较高生产商生产的培养基。
4、结论和展望
近几年一来，针对分析学角度上进行分析，微生物检验技术发展已经从以往普通培养基培养法，逐渐进步发展至当前PCR技术、荧光定量PCR方法以及绝对定量PCR技术方法，这也表示微生物检验从定性至定量实现有效发展。微滴式数字PCR技术作为当前逐渐发展应用的一种绝对定量技术，该技术可以在PCR扩增前，给予核酸分子反应体系准确分割，所以微滴式数字PCR技术检验相比传统PCR技术，特异性与重复性都具有显著优势[11-12]。因为微滴反应可以有效促使反应体系扩散，并且对抑制因子作用进行充分消除，以提高检验扩增效率，从而针对低含量目标核酸分子样品检验上能够取得显著效果。由此可见，针对微生物检验技术与研究，可以尝试有效结合EMA和微滴式数字PCR技术，应用在活体微生物检验中，能够充分发挥出绝对定量检验特点，并且在常规微生物检验过程中，能够有效缩短检测时间，提高灵敏度，实现绝对定量，以提高微生物检验准确性与质量。
总的来说，微生物检验作为微生物检验质量控制的重要技术，当前影响微生物检验结果影响因素除了本文分析的环境、检验人员、标本因素之外，可能影响因素还有许多种，所以还需要不断深入探讨影响检验结果因素，并有效提高微生物检验质量控制，不断进行改进，以提高检验可靠性与准确性，为微生物检验质量控制与监管提供重要保障。
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