陈治宇
哈药集团制药六厂 150026
【摘 要】目的：利用高效液相色谱法测定小儿氨酚黄那敏颗粒中的马来酸氯苯那敏的含量，并分析其混匀度。方法：采用C18柱色谱柱为岛津（250mm×4.6mm，5μm），并用0.3%的已经进行溶解，将甲醛值调整为-0.5mol/L，磷酸二氢钠-三乙胺（60：40:0.02）为流动相，磷酸调节至PH2.3，流速为1Ml/min，检测博长度为215nm，温度为25℃。结果：马来酸氯苯那敏在0.08~0.24μg·ml范围内效果非常好，平均回收率高达98.9%以上，RSD为1.19%。结论：利用高效液相色谱法测定小儿氨酚黄那敏颗粒中马来酸氯苯那敏有着操作简单、准确度高、重现性好、检测速度快的优势，值得推广。
【关键词】小儿氨酚黄那敏颗粒；高效液相色谱法；马来酸氯苯那敏；测定
小儿氨酚黄那敏颗粒也被称之为小儿速效感冒灵，是地方标准调整为国家标准的儿科感冒用药，其成分包含了乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏、人工牛黄以及蔗糖，是儿科临床中的常用药，在过去多年临床中疗效非常明显，主要用于缓解儿童普通感冒和流行性感冒症状，如发热、头痛、四肢酸痛、咳嗽、流鼻涕以及打喷嚏等。在目前国家药品监督局制定的国家药品标准管理中，制定了乙酰氨基酚测定措施，并没有建立了全面的马来酸氯苯那敏的检测鉴定方法，因此这里我们有必要采用高效液相色谱法对马来酸氯苯那敏进行测定，结果显示鉴定效果良好，有着精密度高、重现性好以及平均回收率好的优势，测定结果准确可靠，有效提高小儿氨酚黄那敏颗粒的生产质量，为临床用药安全提供了参考依据。
1、仪器与试药
1.1、仪器
采用了安捷伦1100高效液相色谱仪，486紫外可见波长检测器，G1354A四元溶剂洗脱系统，AG-135电子天平，全自动进口进样器，G2170AA2D色谱工作站。
1.2、试药
选用了符合国家生产标准的小儿氨酚黄那敏颗粒（天津市儿童药厂生产），其马来酸氯苯那敏对照品由国家药品生物检定所提供，批号为10047-200408，含量为99.5%。选择甲醇作为色谱纯，水选择重蒸馏水，磷酸二氢钠为主要分析纯。
2、方法与结果
2.1、色谱条件
选择了岛津C18柱（250mm×4.6mm，5μm），并用0.3%的已经进行溶解，将甲醛值调整为-0.5mol/L，磷酸二氢钠-三乙胺（60：40:0.02）为流动相，磷酸调节至PH2.3，流速为1Ml/min，检测博长度为215nm，温度为25℃。
2.2、溶液制备
采用G-135电子天平精密称取马来酸氯苯那敏对照品10mg，将其放置在100ml的量瓶中，加入蒸馏水进行稀释至预计刻度，摇匀之后，保证1ml试剂大约喊0.1mg的溶液，并将其作为贮备液。利用量瓶精密量取5ml贮备液放置在50ml的量瓶之中，加蒸馏水进行稀释，摇匀。
2.3样品溶液
选取10袋样品用G-135电子天平称量0.5㎎，放置在50ml的量瓶中，加入蒸馏水并用玻璃棒搅拌，搅拌均匀之后置放10分钟使其溶解冷却，然后加水稀释至预计刻度再次进行搅拌，带均匀之后过滤，提取滤液。
2.4系统适用性试验
按照预计处方比例配置马来酸氯苯那敏的隐形对照，分别提取对照品溶液、样品溶液、阴性对照溶液，将这些液体全部注入到液相色谱仪，根据色谱记录图进行显示，结果呈现出阴性，按照峰值保留时间得出大约为3.26分钟，理论马来酸峰值保留时间大约为4.6分钟，理论塔板数大约为7500，具体如图1所示。
2.5线性关系考察
精密吸取马来酸氯苯那敏对照品贮备液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，分别置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取上述溶液20μL注入液相色谱仪，记录峰面积。以马来酸氯苯那敏的峰面积Ｙ对进样量Ｘ（μｇ）进行线性回归，得回归方程为：Ｙ＝1.892×103Ｘ＋11.795，R＝0.9998（ｎ＝6），表明在进样量为0.05～0.5μｇ范围内峰面积与测定浓度呈良好的线性关系。2.5精密度试验取对照品溶液20μL，连续进样5次，测得峰面积的RSD为0.1％（ｎ＝5），表明精密度良好。
2.6重复性试验
取同一批号样品（批号：20031023）5份，按样品含量测定方法测定马来酸氯苯那敏含量为94.0％，RSD＝0.6％（ｎ＝5）。
2.7稳定性试验
取样品溶液1份（批号：20031023），于0，2，4，12，24ｈ分别进样，依法测定马来酸氯苯那敏峰面积，计算，RSD＝1.0％（ｎ＝5）。2.8加样回收试验分别精密称取已知含量的样品（批号：031210，含量89.6％，平均装量5.8898ｇ）5份，置50mL量瓶中，精密加入对照品贮备液（0.511mｇ/mL）1mL，按样品溶液制备方法制备，依法测定含量，计算回收率，结果见表1。
2.9样品含量测定
取对照品溶液与样品溶液，各进样20μL，依法测定，记录马来酸氯苯那敏峰面积，按外标法计算含量（以标示量％计），结果见表2。
2.10
样品含量均匀度考察取样品1袋，置50mL量瓶中，按样品溶液含量测定方法测定含量，依法考察马来酸氯苯那敏含量均匀度，结果见表3
3、讨论
3.1制剂中马来酸氯苯那敏系抗组胺药物，对感冒症状的改善起着重要作用，作用强烈，但在制剂中含量低（0.5mg/袋）。考察了5批不同厂家生产的制剂中马来酸氯苯那敏的含量及含量均匀度，结果有3批平均含量低于标示量的90％；含量均匀度仅1批的A＋1.80S≤15.0，其余4批的A＋1.80S均大于15.0，其中3批的A＋S均大于15.0。根据含量均匀度检查法规定，仅1批符合规定，3批可直接判为不符合规定。结果表明：由于在标准中只对马来酸氯苯那敏作鉴别试验，不作含量测定及含量均匀度检查，故厂家在生产中投料准确性和混料均匀性都存在一定问题。笔者认为有必要对制剂中的马来酸氯苯那敏含量及含量均匀度进行测定。
3.2曾试验过用HPLC法同时测定对乙酰氨基酚及马来酸氯苯那敏的含量，但由于处方中对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏的比例为125∶0.5，含量相差较大，考虑到现行标准中用紫外分光光度法测定对乙酰氨基酚的含量操作简便快速、结果准确可靠，故选择用HPLC法单独测定马来酸氯苯那敏的含量，获得了较好结果。
参考文献
[1]谭菊英, 颜其双, 王娟,等. HPLC-CAD法测定人工牛黄及其制剂小儿氨酚黄那敏颗粒中胆酸和猪去氧胆酸的含量[J]. 中国药师, 2019, 022(012):2321-2323,2345.
[2]程岁寒, 张双庆, 马灿,等. HPLC法测定含体外培育牛黄的小儿氨酚黄那敏颗粒中马来酸氯苯那敏的含量[J]. 中国药品标准, 2019(1):31-36.
[3]施猛, 严玲, 谷容斌. HPLC法测定小儿氨酚黄那敏颗粒中对乙酰氨基酚和马来酸氯苯那敏的含量[J]. 中国民族民间医药杂志, 2009.