肖青青 李欣 宋瑜 高尚璞 李斌
上海中医药大学附属龙华医院好/上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院 上海市 上海市 200030
摘要：目的：测试复方珍芩颗粒对小鼠急性毒性的实验研究。方法：实验中设阴性对照组与实验组，共40只ICR小鼠，每组20只，雌雄各半，实验组予0.33g/ml（3.96g生药/ml）药液，一日给药2次，观察小鼠的体重变化、耗食量、外观体征、行为活动、粪便形状，连续给药14日，并分别于给药后第7、14日称取动物体重。结果：急性毒性实验中所有实验组小鼠在观察期内全部存活，一般行为学观察未见明显异常，继续观察14d，未见明显毒性反应与动物死亡。结论：小鼠一日2次灌胃予珍芩颗粒共316.8g生药/kg，相当于人一次临床用剂量的238倍，未见明显毒性反应，使用安全性高。
关键词：珍芩颗粒；皮肤瘙痒症；毒性实验
Zhenqin Granules; Pruritus; Toxicity test
皮肤瘙痒症为皮肤科的常见症状，属中医学“痒风”的范畴，是一种自觉皮肤瘙痒而无原发性皮肤损害的皮肤病症状[1]，可见于过敏性皮炎、特应性皮炎、湿疹等多种疾病。中药治疗皮肤瘙痒具有一定有效性，且安全性高，受到越来越多的重视。珍芩颗粒是针对过敏性皮炎、特应性皮炎及湿疹等皮肤瘙痒症的纯中药复方制剂，临床应用20余年，能较好地改善红斑、血热、瘙痒的症状，其处方来源于海派夏氏外科的经验方，由黄芩、珍珠母、紫草、灵磁石、牡蛎组成[2-3]。全方以珍芩为君，黄芩苦寒凉血，归经肺胃，善清中上焦之热，血热清则痒自安；珍珠母重镇咸寒，归心经，阳潜则痒自宁，其效力速，两君标本兼顾，共取清热凉血潜阳之效。紫草凉血活血，助黄芩以增凉血之功，凉血不留瘀；磁石、牡蛎咸寒入肾，益阴潜阳，助珍珠母安神止痒，固守药力，共为臣药。诸药合用，共奏清热凉血，潜阳安神之功，对治疗皮肤瘙痒有很强的针对性。本文运用小鼠急性毒性实验考察珍芩颗粒的安全性，为其进一步研究、应用和开发提供毒理研究资料。
1 材料与方法
1.1实验动物 SPF级ICR小鼠40只，雌雄各半，18.4~22.0g，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，动物合格证号：2008001617391。
1.2药物及试剂 珍芩颗粒（江阴天江药业有限公司，批号：1105324，规格：1g浸膏粉相当于12g生药）；乌来糖（国药集团化学试剂有限公司，批号：T20080917）。
1.3实验仪器 血球分析仪（Bayer ADVIA120）、全自动生化分析仪（Hitachi 7020）、钠钾氯分析仪（EasyLyte Plus）、血凝仪（C2000-4型）、自动组织切片染色机（MICROM HMS 740）。
2.方法
2.1 实验分组 40只ICR小鼠随机均分为2组，即阴性对照组与实验组，每组20只动物，雌雄各半，5只/笼饲养。
2.2 给药方法 实验组1d给药2次，给药间隔为4h，每日给药总量为316.8g生药/kg，按分组时体重计算给药量每次40ml/kg，为小鼠口服灌胃的最大给药体积，阴性对照组予同体积溶媒（纯化水）。
2.3 检测指标和方法 首次灌胃前后记录动物大体情况，之后每日观察1次，连续14d，主要观察其外观体征、行为活动和粪便形状。于给药后第7d、14d称取动物体重，给药后第14d处死所有动物并进行大体剖检。
2.4 统计学方法 数据使用SPSS.21.0统计软件处理，计量资料以（X±s）表示，并注明单位，组间比较采用成组样本t-检验与方差分析（P＜0.05表示有差异，P＜0.01表示具有显著性差异）。
3. 结果
3.2 小鼠行为体征、外观形态的观察 珍芩颗粒连续给药14d，实验组与对照组动物在给药期间精神状态良好，毛色光泽、眼睛红亮、反应机敏、采食、饮水、二便、呼吸均未出现异常，眼、口鼻及其他腔道均未见明显异常分泌物和破溃。给药后继续观察14d，各组动物均存活。实验组动物与阴性对照组相比，在给药后观察期内体重均增长，平均体重及体重增长均未见明显组间差异（P>0.05）。（表 3-2-1、表3-2-2）
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3.3 剖检结果 所有动物经大体剖检，主要脏器（心、肝、脾、肺、肾、消化道、胸腺、脑）均未见明显异常。本次实验中，小鼠一日2次口服灌胃给予珍芩颗粒共316.8g生药/kg，相当于人一次临床用剂量（1.33g生药/kg）的238倍，未见明显急性毒性反应与动物死亡。
4讨论
皮肤瘙痒症为皮肤科的常见疾病，类似于中医的“痒风”，在成年人中的发病率较高。临床表现为全身或局部皮肤瘙痒，患者因不断搔抓，致使皮肤出现抓痕、血痂、色素沉着以及苔癣样变等继发性皮肤损害[4]，严重影响身体健康，降低生活质量，且影响患者情绪状态。
皮肤瘙痒症的致病因素较为复杂，有内外因之分，内因常合并某些基础疾病，如糖尿病、肝肾等脏器功能病变，外因则与外界的特定刺激相关[5]。西医治疗主要是运用抗组胺类药物、外用糖皮质激素，都存在一定副作用，而且一旦停药更易复发。尤其是长期用药, 更需要寻找安全性较高的药物[6]。珍芩颗粒是著名中医皮肤科专家夏涵教授创制的经验方，在临床上主要用于治疗过敏性皮炎、特应性皮炎及湿疹等皮肤瘙痒症[7-9]，与临床上常用的乌蛇止痒丸、肤痒颗粒冲剂相比，该方临床疗效显著[10]。然而，作为医院制剂缺乏有效性及安全性的实验数据，限制其使用与发展。本研究基于珍芩颗粒的临床收效颇丰，对其药物安全性和毒副作用进行动物实验评估，以期为今后研究奠定基础。
小鼠连续灌胃予珍芩颗粒14d，实验组小鼠大体状况未见明显异常。给药后7d、14d称取动物体重，显示实验组动物的体重与同期阴性对照组动物相比未见明显差异。继续观察14d，未见明显毒性反应与动物死亡，与同期阴性对照组动物相比未见明显差异。急性毒性实验结果表明，小鼠一日2次灌胃给予珍芩颗粒共316.8g生药/kg，相当于人服用一次临床剂量（1.33g生药/kg）的238倍，未见明显急性毒性反应与动物死亡。以上结果显示，珍芩颗粒安全性高。
参考文献：
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[6] Sillevis Smitt J H. [Constitutional eczema; the possibilities of local treatment][J]. Nederlands Tijdschrift Voor Geneeskunde, 2002, 146(9):400-404.
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[8] 李苏,陈洁,李斌,等.芩珠凉血合剂治疗亚急性湿疹的随机对照研究[J].世界临床药物,2016,37(3):173-176.
[9] 李苏,陈洁,李斌,等.芩珠凉血合剂对湿疹患者外周血GRα受体的影响[J].云南中医学院学报,2016,39(1):17-20.
[10] 周婉,金若敏,李斌,等.复方珍芩颗粒抗炎、止痒、镇静作用的实验研究[J].上海中医药大学学报,2013,27(2):66-70.
* [基金项目]：上海市2018年度“科技创新行动计划”生物医药领域科技支撑项目——治疗痤疮复方中药白地祛脂颗粒的临床前研究（编号：18401932300）
* 龙华医院第二批优秀青年医师临床技能提升计划
[作者简介]：肖青青，女，主治医师， 18817338918@163.com
[通讯作者]：李斌，主任医师 单位：上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院皮肤科E-mail：18930568129@163.com